二手伯乐荧光定量PCR

二手伯乐荧光定量PCR，伯乐 Bio-Rad CFX384 荧光定量 PCR 仪（通常指 CFX384 Touch 或 CFX Opus 384 型号）是美国伯乐公司（Bio-Rad）推出的一款高性能、高通量实时荧光定量 PCR 系统。它专为满足大规模样本检测和复杂实验设计需求而研发，在生命科学研究、临床诊断、药物筛选及食品安全检测等领域发挥着核心作用。以下是对该仪器的全面介绍。

一、 核心设计理念与系统构成

CFX384 系统采用模块化设计，通常由 C1000 Touch 热循环仪 与 CFX384 光学检测模块 组合而成。这种设计理念旨在将精准的温控技术与高灵敏度的光学检测能力结合，确保在 384 孔的高通量环境下，依然能获得稳定、可靠的数据。

• 高通量平台：其核心优势在于 384 孔板的设计，相比传统的 96 孔板，通量提升了 4 倍，能够一次性处理海量样本，极大提高了实验效率，特别适合大规模基因表达谱分析、群体遗传学研究和药物高通量筛选。

  
  

• 独立运行能力：仪器配备了 8.5 英寸（或 7 英寸）彩色 LCD 触摸屏，支持脱离电脑独立运行。用户可以直接在仪器面板上编辑程序、设置样品、启动运行并实时监控扩增曲线，操作极为便捷。

  
  

二、 核心技术参数与性能指标

1. 温控系统（Thermal Cycling）

   
   

• 升降温速率：可达 2.5°C/秒，快速的热循环速度有助于缩短实验周期，减少非特异性扩增。

  
  

• 温度准确性：±0.2°C（在 90°C 时），确保每个循环的温度设定精准无误。

  
  

• 温度均一性：±0.3°C 至 ±0.4°C（全孔范围），孔间一致性有效减少了“边缘效应"，保证了高通量检测结果的可靠性。

  
  

• 动态温度梯度功能：支持在 30–100°C 范围内设置 1–24°C 的温差，可同时运行 8-16 个不同的温度条件。这一功能对于快速优化引物退火温度、筛选反应条件至关重要，能显著节省宝贵的实验时间和试剂成本。

  
  

2. 光学检测系统（Optical Detection）

   
   

• 检测通道：通常配备 5-6 个独立荧光通道（包括 FAM, HEX, Texas Red, Cy5 等），部分型号包含专用的 FRET（荧光共振能量转移）通道。

  
  

• 光源与检测器：采用长寿命的 LED 激发光源（寿命 ≥ 10,000 小时）和光敏二极管检测器，避免了传统卤钨灯频繁更换的麻烦。

  
  

• 光梭检测技术（OptiScan）：这是伯乐的核心技术。光学头采用“光梭"式扫描，独立激发和检测每一个样品孔，确保光程一致，无需使用参比染料（ROX）进行孔间校正，同时限度地减少了荧光信号的交叉干扰。

  
  

• 灵敏度与动态范围：检测灵敏度，可达单拷贝级别（能检测人类基因组中的单拷贝基因）；动态范围宽达 10 个数量级，能够准确检测从极低浓度到高浓度的样本。

  
  

3. 反应体系与兼容性

   
   

• 反应体积：支持 1–30 µl 的反应体系，推荐使用 5–20 µl。对于珍贵样本，即使使用低至 3 µl 的体系也能获得理想结果，有效节约试剂成本。

  
  

• 多重检测能力：每孔最多可同时检测 4 个目标基因，支持多重 PCR 反应，提高了数据通量和实验效率。

  
  

三、 软件与数据分析功能

配套的 CFX Maestro 软件（或 CFX Manager 软件）功能强大，界面直观，提供了全面的数据分析解决方案：

• 多种分析模式：支持定量（标准曲线法）、相对定量（ΔΔCq 法）、基因表达分析、熔解曲线分析、等位基因分型（基因分型）、终点分析等。

  
  

• 高级统计功能：内置 t-检验、ANOVA 方差分析等统计学工具，可直接在软件中进行差异显著性分析。

  
  

• 数据可视化与导出：支持生成柱状图、散点图、箱线图、火山图、聚类热图等多种图表，数据可导出为 Excel、Word、 PDF 等格式，方便撰写报告和发表文章。

  
  

• 合规性与云平台：软件符合 FDA 21 CFR Part 11 法规要求（安全版），适用于 GLP/GMP 环境。部分新型号支持 BR.io 云平台，可实现远程实验设置、实时监控和数据云端存储。

  
  

四、 主要应用领域

基于其高通量、高灵敏度和多重检测能力，CFX384 广泛应用于以下场景：

1. 高通量基因表达分析：大规模转录组研究、药物靶点筛选、信号通路研究等。

   
   

2. 病原体检测与定量：病毒载量检测（如 HIV、HPV、SARS-CoV-2）、细菌定量、流行病学研究。

   
   

3. 基因分型与突变检测：单核苷酸多态性（SNP）分析、癌症相关基因突变筛查、遗传病诊断。

   
   

4. 表观遗传学研究：DNA 甲基化分析（结合亚硫酸氢盐处理）。

   
   

5. 食品安全与农业：转基因成分（GMO）检测、物种鉴定。

   
   

6. 工业质量控制：生物制品工艺监控、质粒拷贝数测定。

   
   

五、 总结

二手伯乐荧光定量PCR，伯乐 Bio-Rad CFX384 荧光定量 PCR 仪凭借其 “高通量、高精度、智能化" 的特点，成为了现代分子生物学实验室进行大规模、高效率研究的利器。其稳定的温控性能、免校正的光学系统以及强大的数据分析软件，使其在科研和临床应用中均表现出色，是进行精准定量和复杂遗传分析的平台之一。