安捷伦液相色谱仪(如1260、1290系列)凭借高精度、高稳定性广泛应用于实验室分析,柱压参数是反映仪器运行状态的核心指标。柱压过高会导致流动相流速不稳、色谱柱损伤,压力波动大则引发基线漂移、峰形异常,直接影响检测数据准确性。本文结合安捷伦仪器结构特点与实操案例,系统梳理两类故障的核心原因,提供针对性排查方法与解决策略,助力快速恢复仪器正常运行。
一、柱压高的核心原因与解决方法
安捷伦液相色谱仪正常柱压范围需结合色谱柱型号、流动相粘度确定,超出基线值30%以上可判定为柱压高,故障多源于管路堵塞、色谱柱污染或流动相异常,按“由前到后"顺序排查高。
(一)流动相及前处理系统问题
流动相污染或脱气是常见诱因。未过滤的流动相含固体杂质,会堵塞溶剂滤头、在线过滤器;缓冲盐流动相放置过久易结晶,沉积在管路及色谱柱入口。解决方法:流动相需经0.45μm滤膜过滤,超声脱气15-20分钟;含盐流动相现配现用,使用后立即用纯水冲洗系统30分钟,避免结晶残留。溶剂滤头堵塞时,用5%稀硝酸浸泡过夜或超声清洗,纯水冲洗干净后复位,污染严重则直接更换。
(二)管路与进样系统堵塞
进样阀、在线过滤器及连接管路堵塞会导致压力骤升。拆下色谱柱,用两通接头连接管路,启动仪器观察压力:若压力仍高,说明堵塞位置在管路或进样阀。进样阀堵塞可将泵液管路接至色谱柱接口,切换至load状态,用甲醇小流速冲洗10分钟;在线过滤器堵塞则拆卸后用无水乙醇超声清洗,晾干后安装。连接管路内壁残留杂质时,用异丙醇梯度冲洗,必要时更换老化管路。
(三)色谱柱污染与损坏
色谱柱筛板堵塞、柱内污染是柱压高的主要内因。样品杂质沉积在筛板或柱内,会阻碍流动相通过;缓冲盐结晶、强保留组分吸附会导致柱压持续升高。解决方法:先拆去保护柱,若柱压下降,说明保护柱污染,更换保护柱即可。色谱柱筛板堵塞可反向连接色谱柱,用10倍柱体积的甲醇-水(1:1)低流速冲洗,避免连接检测器以防杂质进入流通池;污染严重时,用甲醇-异丙醇(4:6)混合液冲洗,恢复柱效。若冲洗后柱压仍高,可能为筛板破损或柱床塌陷,需更换色谱柱或维修筛板。
二、压力波动大的核心原因与解决方法
压力波动大(波动值超过100psi)多伴随基线不稳,核心原因是系统进气、泵体故障或色谱柱异常,需重点排查气路与泵体部件。
(一)系统进气与气泡干扰
流动相脱气不充分、吸液管路进气会导致压力忽高忽低。吸液管路漏气时,管壁可见微小气泡,泵体吸液不均;流通池积存气泡会加剧压力波动,同时影响基线。解决方法:重新对流动相脱气,打开旁通阀大流速排液2分钟,驱赶管路气泡;吸液管路接头松动时紧固密封,必要时更换密封垫。流通池气泡可通过堵塞废液管出口2-3秒建立背压,重复10-20次排出,或用甲醇低流速冲洗流通池。
(二)泵体部件故障
泵体单向阀堵塞、柱塞密封圈磨损是压力波动的核心机械原因。单向阀污染会导致吸液效率下降,压力波动明显;密封圈磨损会造成漏液,伴随压力骤降后回升。解决方法:拆下单向阀,用甲醇超声清洗15分钟,去除内部杂质,安装后观察压力变化;若清洗无效则更换单向阀。柱塞密封圈磨损需及时更换,更换后用甲醇冲洗泵头,确保密封良好。泵头污染时,用棉花沾甲醇擦拭柱塞杆,清除残留杂质。
(三)色谱柱与流动相适配问题
流动相混合后吸放热、色谱柱柱床不稳定会引发压力波动。如乙腈与水混合吸热,导致流动相温度变化,粘度波动进而影响柱压;色谱柱柱床塌陷会使压力忽高忽低,伴随峰形畸变。解决方法:梯度洗脱时采用预混流动相,或开启柱温箱控制温度(30-35℃),减少温度波动影响。柱床塌陷需更换色谱柱,日常避免剧烈撞击色谱柱,流动相pH值控制在色谱柱耐受范围。
三、日常预防与维护要点
定期维护可大幅降低故障概率。每周检查溶剂滤头、在线过滤器状态,及时清洁或更换;每月更换泵体柱塞密封圈,每3-6个月对单向阀进行深度清洁。色谱柱使用后用合适溶剂冲洗:反相柱用甲醇冲洗30分钟,正相柱用正己烷冲洗,长期停用前用纯甲醇或正己烷封存。流动相严格遵循过滤、脱气流程,样品进样前经0.22μm滤膜过滤,避免杂质进入系统。此外,定期校准仪器压力传感器,确保数值精准。
四、结语
安捷伦液相色谱仪柱压高及压力波动大,多与系统堵塞、进气、泵体故障相关,遵循“先排查流动相与管路,再检查色谱柱与泵体"的逻辑,可高效定位故障点。日常维护中,注重流动相处理、管路清洁与色谱柱保养,能有效延长部件寿命,保障仪器稳定运行。若故障涉及泵体内部精密部件或电路板问题,建议联系安捷伦原厂售后,避免自行拆卸造成二次损坏,确保检测工作的连续性与数据可靠性。