液相色谱仪作为高效分离分析的核心设备，在医药、环境、食品等领域应用广泛。气泡问题是其使用过程中的故障之一，轻则导致基线漂移、噪声增大，重则引发保留时间不稳定、峰形畸变甚至泵体损坏，直接影响分析结果的准确性和可靠性。本文系统梳理气泡产生的关键成因，并提出针对性的处理与预防方案，为实验人员高效解决该问题提供技术参考。
一、气泡产生的核心原因
液相色谱仪的流路系统由溶剂瓶、输液泵、进样阀、色谱柱、检测器等部件组成，气泡的产生与流动相特性、仪器状态及操作规范度密切相关，具体可分为以下四类。
（一）流动相自身特性与制备缺陷
流动相是气泡产生的主要源头。其一，溶剂的溶解氧特性是基础因素，水相溶剂（如超纯水）在常温常压下可溶解约8mg/L的氧气，有机相溶剂（如甲醇、乙腈）也会溶解一定量空气，当流动相温度升高或压力降低时，溶解的气体便会析出形成气泡。其二，混合流动相的配比过程易引入气泡，尤其是水相与有机相混合时，因密度差异产生湍流，空气被包裹其中；若混合后未充分脱气直接使用，气泡会随流动相进入流路。其三，溶剂瓶密封不严或液面过低时，空气会通过瓶盖缝隙或吸液管末端进入流动相，形成持续的气泡来源。
（二）仪器流路系统的设计与磨损
输液泵的密封组件磨损是气泡进入的关键节点。泵头内的密封圈、单向阀若出现老化或划伤，会导致泵腔负压时吸入空气，形成“泵吸气泡"；尤其在使用含酸、碱的流动相时，密封件腐蚀加速，气泡问题更易频发。进样阀的阀芯与阀座间隙过大或污染，会使进样过程中空气渗入流路，同时进样针穿刺进样垫后若未及时排气，也会将空气带入系统。此外，流路中的接头、管路死体积过大，或管路存在破损、裂缝，都会导致流动相流速波动，促使溶解气体析出并聚集。
（三）操作过程的不规范操作
开机启动时的排气流程缺失是气泡产生的常见诱因。若直接开启输液泵而未对泵头、管路进行排气，泵腔内的空气无法排出，会形成“气锁"现象，导致泵无法正常输送流动相，同时空气持续进入流路。更换流动相或溶剂瓶时，未先冲洗吸液管并排气，会使吸液管内的空气被吸入泵体；色谱柱更换后，若未通过低流速缓慢冲洗排除柱内空气，气泡会滞留在色谱柱填料间隙，影响分离效果。此外，流动相更换后未平衡系统直接进样，温度与压力的突变会引发气泡析出。
（四）环境因素的间接影响
实验室温度波动过大易导致气泡产生，当环境温度升高时，流动相的气体溶解度降低，原本溶解的空气会析出；而温度骤降时，流路内压力变化也会促使气泡形成。此外，实验室气压的剧烈变化（如通风橱强排风导致局部负压）会使溶剂瓶内压力失衡，空气被吸入流动相，尤其在高海拔地区，气压较低，气泡问题更为突出。
二、气泡问题的分级处理方案
针对气泡产生的不同原因和严重程度，需采取“源头控制—系统排气—故障排查"的递进式处理策略，确保高效解决问题。
（一）流动相制备阶段的源头控制
优化流动相制备流程是预防气泡的关键。单一溶剂需采用超声脱气（20-30分钟）或真空脱气方式去除溶解气体，混合流动相应采用“先混合后脱气"的方式，避免混合过程引入气泡；对于易产生气泡的混合体系（如乙腈-水），可适当延长超声时间或采用在线脱气装置。溶剂瓶需选用带密封垫的专用瓶，瓶盖拧紧后确保无漏气，同时保持液面高度不低于1/3瓶容积，避免吸液管吸入空气。此外，流动相应现配现用，避免长时间放置导致气体重新溶解。
（二）系统启动与运行中的排气操作
开机时需严格执行排气流程：先将吸液管置于纯甲醇或乙腈中，打开泵的排气阀，以3-5mL/min的流速冲洗3-5分钟，观察排气口无气泡连续排出后关闭排气阀；随后将吸液管切换至目标流动相，重复排气操作，确保泵腔内无空气残留。若出现泵头气锁，可拆卸泵头出口管路，手动推动柱塞杆排出空气后重新安装。进样前需对进样阀进行排气，通过反复推拉进样针将阀内空气排出；更换色谱柱后，以0.2-0.5mL/min的低流速冲洗30分钟，逐步排出柱内气泡。
（三）故障部件的排查与维修
若排气后气泡问题仍未解决，需排查仪器部件故障。对于输液泵，拆解泵头检查密封圈和单向阀，若发现磨损或腐蚀，及时更换同型号配件；更换后需重新校准泵的流速精度。对于进样阀，用专用清洗剂冲洗阀芯，若间隙过大需进行研磨修复或更换阀芯。检查流路接头是否松动，管路是否有破损，更换老化管路时确保切口平整，接头连接紧密。此外，检查检测器流通池，若气泡滞留其中，可通过提高流速或反向冲洗的方式排出，必要时拆卸流通池进行清洗。
（四）运行过程中的实时处理技巧
运行中出现基线漂移或噪声增大时，可暂停进样，将流动相流速提高至正常流速的1.5倍，冲洗10-15分钟，促使流路内微小气泡聚合排出。若色谱峰出现拖尾或分裂，可能是色谱柱内残留气泡，可采用“梯度升压"方式：逐步提高柱压至额定压力的80%，保持5分钟后缓慢降压，重复2-3次，利用压力变化排出柱内气泡。实验过程中保持实验室温度稳定（控制在20-25℃），避免通风橱强排风直接对着溶剂瓶，减少环境因素对气泡产生的影响。
三、结语
液相色谱仪的气泡问题本质是“气体溶解-析出-滞留"的动态过程，其解决需兼顾预防与处理。通过规范流动相制备、严格执行排气流程、定期维护仪器部件，可从源头减少气泡产生；而针对不同场景采用分级处理方案，能快速解决运行中的气泡故障。实验人员需熟练掌握气泡产生的成因与处理技巧，建立“预防为主、快速响应"的操作规范，确保仪器稳定运行，提升分析结果的可靠性。
