1. 目的与适用范围
1.1 目的：规范岛津LC-10AT型高效液相色谱仪（以下简称“仪器"）的操作流程、日常维护及安全注意事项，确保仪器稳定运行、检测数据精准可靠，延长仪器使用寿命，保障操作人员人身安全与实验室环境安全。
1.2 适用范围：本规程适用于岛津LC-10AT型高效液相色谱仪的日常开机、参数设定、样品检测、关机维护及常见简单故障处理，涵盖科研实验、工业质检、生物医药等领域的常规样品分析，由经过专业培训的仪器操作人员严格遵照执行。
2. 仪器组成与原理
2.1 仪器组成：该仪器主要由2个LC-10ATvp溶剂输送泵（分主/A泵和副/B泵）、Rheodyne 7725i手动进样阀、SPD-10Avp紫外-可见检测器、SCL-10AVP系统控制器、CLASS-VP（Ver. 6.1）工作站、IBM台式电脑及打印机、不间断电源等辅助设备组成，各部件协同完成样品的分离、检测与数据处理工作。
2.2 工作原理：利用不同物质在固定相和流动相之间的分配系数差异，当样品随流动相通过色谱柱时，各组分被逐一分离，随后进入紫外-可见检测器，检测器将组分浓度转化为电信号，经工作站处理后形成色谱图，根据色谱峰的保留时间定性、峰面积定量，实现样品中各组分的精准分析。
3. 操作前准备
3.1 环境检查：确认实验室温度控制在15-30℃，相对湿度≤70%，无粉尘、腐蚀性气体及强烈震动，电源电压稳定，接地良好，避免仪器受电磁干扰。
3.2 试剂与样品准备：根据检测方法要求，配制合适的流动相，选用对应规格的0.45μm滤膜过滤，超声脱气20分钟，去除流动相中气泡，防止检测基线波动；配制样品和标准溶液，同样用0.45μm滤膜过滤，避免杂质堵塞色谱柱；将处理好的流动相、样品及标准溶液置于指定位置，做好标记。
3.3 仪器检查：检查仪器各部件的电源线、数据线、输液管道连接是否牢固，无松动、漏液现象；检查色谱柱是否完好，柱进出口位置与流动相流向保持一致，根据检测需求更换合适的色谱柱和定量环；检查储液瓶清洁无杂质，吸滤器无堵塞，确保流动相顺利输送。
4. 开机操作流程
4.1 电源开启：接通不间断电源，依次开启B泵、A泵、检测器、系统控制器，待泵和检测器自检完成（无报错提示）后，打开电脑显示器、主机，确保各设备正常启动。
4.2 工作站启动：启动CLASS-VP工作站，从Windows任务栏中选择“Start > Programs > Chromatography > CLASS-VP"，或通过桌面快捷方式打开主菜单；输入用户名“system"、口令“2001"登录，待SCL-10Avp发出蜂鸣声，确认计算机与仪器建立连接，打开Instrument窗口；同时启动色谱图监视器，设置受监视项的类型和格式，开启脱机处理功能并选择对应仪器名称。
4.3 参数设定：点击“New"按钮选择“New Method"，加载缺省方法参数，通过LC Setup Assistant窗口点击泵和检测器图标配置参数；设定流动相比例、流速（柱在线时一般不超过1ml/min）、检测波长，根据需求设置梯度洗脱程序（输入时间、流速、流动相浓度等参数）；设定完成后，选择“File > Method > Save as"保存方法文件，将方法下载到SCL-10Avp，待仪器状态栏变为绿色、“Ready"指示灯亮起，完成参数设定。
4.4 排气与平衡：将A/B管路的吸滤器放入对应流动相储液瓶，逆时针转动排液阀180°，按下A/B泵的“Pump"键，以9.9ml/min的流速冲洗3分钟，排尽管路气泡后，顺时针关闭排液阀；若气泡未排尽，可重复操作，或拆下柱入口连接管冲洗后重新连接；启动泵，用检验方法规定的流动相冲洗系统，等度洗脱需冲洗不少于6倍柱体积，梯度洗脱需先以初始条件平衡，并运行1-2次空白梯度；同时进行基线检查，设定噪音和漂移阈值，直至基线漂移≤0.01mV/min、噪声≤0.001mV，确认系统达到平衡。
5. 样品检测操作
5.1 进样准备：按检测器键调，通过工作站校正基线点；用试样溶液清洗注射器3-5次，排除注射器内气泡后，抽取适量样品（体积不超过定量环容积的3倍），确保样品无气泡、无杂质。
5.2 手动进样：将进样阀手柄置于“Load"位置，缓慢注入样品溶液，确保样品进入定量环；快速将手柄切换至“Inject"位置，同时点击工作站“开始采集"按钮，记录色谱图，检测过程中密切观察仪器压力、基线变化，若出现异常及时停止检测。
5.3 数据处理：检测完成后，工作站自动生成色谱图，操作人员根据标准溶液色谱峰，设定积分参数，计算样品中各组分的含量；核对数据准确性，保存色谱图和检测报告，按要求整理归档。
6. 关机操作流程
6.1 系统冲洗：检测结束后，用纯溶剂（如甲醇）冲洗色谱柱和管路，流速设为1ml/min，冲洗时间不少于30分钟，清除柱内残留的样品和流动相，防止色谱柱堵塞、损坏。
6.2 参数复位：关闭梯度程序，将泵流速调至0，关闭检测器灯管，在工作站中保存检测方法和数据，退出CLASS-VP工作站。
6.3 电源关闭：依次关闭电脑主机、显示器、打印机，再关闭系统控制器、检测器、A泵、B泵，最后关闭不间断电源；整理实验台面，将流动相、样品妥善存放，清理废液。
7. 日常维护与注意事项
7.1 日常维护：每日检测结束后，清洁仪器表面污渍，检查输液管道是否漏液、堵塞；每周更换储液瓶中的流动相，清洗吸滤器，检查色谱柱压力是否正常；每月对仪器进行全面检查，校准检测器波长，清理废液瓶，检查各部件连接情况；每半年更换色谱柱密封圈，对泵体进行维护保养。
7.2 注意事项：操作人员必须经过专业培训，熟悉仪器结构和操作流程，严禁违规操作；流动相需现配现用，避免使用过期、变质试剂，腐蚀性流动相需单独存放，操作时佩戴手套、护目镜；进样时动作要快速、规范，避免样品污染和气泡进入；检测过程中若出现压力骤升、基线异常、漏液等情况，立即停泵检查，排除故障后方可继续操作；仪器长期不用时，需用纯甲醇冲洗系统后关机，定期开机运行30分钟，防止部件老化；严格遵守实验室安全规定，妥善处理废液，严禁随意倾倒。
8. 简单故障处理
若出现基线波动过大，可能是流动相中有气泡或检测器灯能量不足，需重新脱气流动相或更换检测器灯；若泵压力过高，可能是管路堵塞或色谱柱污染，需冲洗管路、更换滤膜或清洗色谱柱；若进样后无色谱峰，可能是进样阀故障或检测器未调，需检查进样阀或重新调；故障无法解决时，及时联系专业维修人员，严禁自行拆卸仪器。
