光照培养箱作为植物组织培养、微生物育种、种子发芽试验的核心设备，其内部环境的洁净度直接决定实验材料的存活率与实验数据的真实性。箱内高湿、恒温及光照环境极易滋生霉菌、细菌等微生物，造成样品交叉污染。本文以标准化文档形式，系统梳理光照培养箱的物理灭菌、化学灭菌及联合灭菌三大类核心方法，详细阐述紫外线照射、高温干热、熏蒸、酒精擦拭等主流灭菌方式的操作流程、适用场景及注意事项，建立 “日常消毒 - 定期灭菌 - 深度清洁" 的三级防护体系。全文约 1500 字，旨在为实验室提供科学、安全、高效的灭菌实操指南，保障设备处于无菌运行状态。

光照培养箱集成了光照强度控制、恒温恒湿调节等功能，为植物细胞、微生物提供了模拟自然的生长条件。然而，这种温暖、潮湿、富含营养（如植物组培苗渗出液）的环境，也是杂菌快速繁殖的 “温床"。一旦灭菌，杂菌不仅会与目标样品争夺营养，还会释放代谢产物干扰实验结果，甚至导致整批实验材料腐烂报废。

与普通恒温培养箱不同，光照培养箱因含有光敏元件、塑料材质的光照架和密封条，对灭菌剂的腐蚀性和灭菌温度有严格限制。因此，选择合适的灭菌方法，在杀灭杂菌的同时保护设备核心部件，是实验室管理的关键课题。本文结合仪器特性，制定分场景的标准化灭菌规程，确保实验安全与设备安全。

物理灭菌法具有无化学残留、操作便捷的特点，适用于日常使用后的快速处理，是光照培养箱灭菌的基础手段。

该方法利用紫外线破坏微生物的 DNA 结构，适用于箱体内表面、风道及光照架的日常消毒。操作时，首先清空箱内所有样品与培养架，用湿布擦拭表面灰尘（避免灰尘阻挡紫外线）；随后关闭箱门，开启紫外线灯，设定照射时间为 30-60 分钟。需注意，紫外线穿透力极弱，需定期调整灯管位置，确保箱体死角均能被照射；同时，紫外线对人体皮肤和眼睛有伤害，灭菌期间严禁打开箱门。建议每 3 个月更换一次紫外线灯管，以保证灭菌效能。

利用高温使微生物蛋白质变性，适用于无塑料部件的内胆深度清洁。由于光照培养箱的密封条和传感器多为不耐高温材质，严禁使用超过 60℃的高温。操作流程为：清空箱体后，开启设备的加热功能，将温度设定为 55℃-60℃，同时关闭加湿功能，运行 2-3 小时。高温结合干燥环境可有效抑制霉菌孢子萌发，杀灭大部分细菌。此方法需严格监控温度，防止损坏控温探头及光照系统线路。

当发生严重污染或进行重大实验前，需采用化学灭菌法进行深度处理。操作时必须严格做好个人防护，并确保通风，防止化学试剂腐蚀设备或影响实验样品。

这是针对光照培养箱的化学灭菌手段，适用于内胆、培养架、传感器及箱门密封条。操作时，用无菌纱布蘸取 75% 医用酒精，仔细擦拭箱体内壁、隔板、层架及风道，重点清洁角落、缝隙及容易堆积污垢的部位。对于塑料材质的光照板，应轻轻擦拭，避免酒精过量渗入线路接口。擦拭后，关闭箱门熏蒸 15 分钟，再打开箱门通风 30 分钟，待酒精挥发后方可使用。

适用于对无菌要求的实验，可有效杀灭芽孢和真菌。需使用专用的灭菌剂或雾化设备。操作时，将灭菌剂放置于箱体，关闭箱门并确保密封良好，启动雾化装置，使蒸汽充满箱体，作用时间约为 60-90 分钟。灭菌结束后，必须开启设备的强排风扇或打开箱门通风至少 1 小时，直至无刺激性气味。注意： 高浓度可能对部分橡胶密封条有老化作用，建议灭菌后在密封条上涂抹少量医用凡士林进行保养。

该方法灭菌效果，但因甲醛具有强致癌性且难以清除，仅在发生严重霉菌污染且其他方法无效时使用。操作时需严格遵循实验室危化品管理规定，熏蒸后需用氨水进行中和，并通风换气 24 小时以上。鉴于其高风险性，在光照培养箱（含精密电子元件）中应尽量避免使用。

为兼顾灭菌效果与设备寿命，建议建立 “三级联合灭菌体系"：每日实验结束后，采用 75% 酒精擦拭结合紫外线照射 30 分钟；每周进行一次 55℃高温干热灭菌；每月或实验污染后，进行一次低温等离子深度灭菌。

在灭菌操作中，需严格遵守以下禁忌：，严禁使用含氯消毒剂（如 84 消毒液），其强氧化性会严重腐蚀不锈钢内胆和金属部件；第二，灭菌前必须移除所有植物样品和培养基，防止灭菌剂对样品造成损伤；第三，涉及电气部件（如光照灯座、传感器）时，避免液体灭菌剂直接喷淋，防止短路故障。

光照培养箱的灭菌工作是一项系统性工程，核心在于 “预防为主，分级处理"。日常操作中，应将酒精擦拭和紫外线照射作为常态化工作，及时清除潜在污染源；在面对高要求实验或严重污染时，需科学选用高温或等深度灭菌方法。

实验室管理人员需根据实验材料的敏感性和设备的材质特性，灵活选择灭菌方案，严格执行操作流程，做好灭菌记录。只有建立科学、规范的灭菌制度，才能从源头上杜绝交叉污染，保障植物组培、微生物培养等实验的顺利进行，同时限度延长光照培养箱的使用寿命。