安捷伦液相色谱仪作为高效分离分析的核心设备，在医药、环境、食品等领域应用广泛。其运行稳定性直接决定检测数据的准确性与可靠性，而柱压高、柱压不稳定、峰分叉是使用过程中最易出现的三类故障。本文结合安捷伦液相色谱仪的结构特性与实际应用经验，深入剖析三类故障的核心成因，并提供系统的排查与解决方法，为实验室人员提供实操性指导。
一、柱压高问题：成因与解决策略
正常情况下，安捷伦液相色谱仪的柱压会保持在相对稳定的范围（具体数值因色谱柱型号、流动相黏度而异，如C18柱在甲醇-水体系中通常为8-12MPa）。当柱压超过正常范围30%以上时，可判定为柱压高故障，需从系统堵塞、色谱柱污染、流动相异常三方面排查。
首先，系统流路堵塞是柱压高的首要诱因。进样阀、在线过滤器、色谱柱入口筛板是易堵塞部位。排查时可按“由前至后"原则拆分系统：先断开色谱柱入口，用纯甲醇或乙腈以1.0mL/min流速冲洗流路，若柱压恢复正常，说明堵塞位于色谱柱前端；若压力仍高，再断开进样阀出口，冲洗进样阀至在线过滤器段，若压力下降，需拆解在线过滤器更换滤膜（通常为0.22μm有机相滤膜）；若进样阀堵塞，需用专用清洗液超声清洗阀芯。
其次，色谱柱污染或堵塞是柱压高的核心原因。样品中的颗粒物、强保留组分易沉积在柱入口或孔隙中。轻度污染可通过“反向冲洗"解决：将色谱柱反向连接，用甲醇-乙腈（1:1）混合溶剂以0.5mL/min流速冲洗2-4小时，利用反向流动冲开前端堵塞的颗粒物；若为强保留污染物（如蛋白质、色素），需根据污染物性质选择清洗溶剂，如碱性污染物用5%氨水-甲醇溶液冲洗，酸性污染物用1%甲酸-乙腈溶液冲洗，冲洗后需用纯溶剂过渡平衡。若冲洗后柱压仍高，需更换柱入口筛板（需匹配色谱柱型号，如4.6mm内径柱对应4.6mm筛板）。
最后，流动相配置不当易被忽视。未过滤的流动相含颗粒物，会直接堵塞流路；含盐流动相未及时清洗易析出盐结晶，尤其在柱温较低时。解决方法为：所有流动相必须经0.22μm滤膜过滤，水相流动相需现配现用；实验结束后，用5%甲醇水溶液冲洗含盐流动相流经的流路30分钟，再用纯甲醇冲洗至基线稳定。
二、柱压不稳定问题：波动溯源与校准方案
柱压波动超过±0.5MPa时，会导致保留时间漂移，影响定性准确性。故障根源主要集中在输液系统、气泡干扰、色谱柱状态三方面。
输液系统异常是常见诱因。安捷伦泵的单向阀磨损、密封圈老化会导致输液脉冲，表现为柱压周期性波动。排查时可观察压力曲线：若呈周期性尖峰波动，需拆解单向阀，用异丙醇超声清洗阀芯（避免用硬物刮擦），若磨损严重需更换单向阀组件；若压力呈无规律波动，可能是泵密封圈老化，需检查密封圈是否渗漏，及时更换同型号密封圈。此外，比例阀故障会导致流动相混合比例波动，需用校准工具对比例阀进行流量校准。
气泡干扰是易被忽略的因素。流动相脱气、流路中进入空气会导致柱压骤升骤降。解决时需“分步脱气"：新配置流动相先经超声脱气20分钟，再通过仪器在线脱气机脱气；若流路已进气泡，需关闭泵，打开排液阀，手动推动柱塞杆排出气泡，再以低流速（0.2mL/min）运行5分钟，待压力稳定后逐渐升高流速。
色谱柱填充不均匀或柱床塌陷也会导致压力波动。新柱使用前未充分平衡、骤升流速易造成柱床紊乱。处理方法为：新柱用纯甲醇以0.3mL/min流速平衡1小时，再逐步升高流速至设定值；若柱床塌陷，需更换色谱柱，日常使用中需避免流速骤变（每次调整不超过0.2mL/min）、柱温骤升骤降（升温速率≤5℃/min）。
三、峰分叉问题：分离效能异常的排查路径
峰分叉表现为单一组分出现两个或多个重叠峰，核心原因是色谱柱效能下降、样品预处理不当或系统污染。需按“样品-色谱柱-系统"的顺序排查。
样品预处理不足是首要因素。样品中的杂质与目标组分共洗脱、样品溶解性差形成沉淀，都会导致峰分叉。解决方法为：优化样品前处理流程，如用固相萃取（SPE）去除杂质，选择与流动相匹配的溶剂溶解样品（避免用强极性溶剂溶解非极性样品）；若为碱性样品（如生物碱），可在流动相中加入0.1%三乙胺抑制拖尾与分叉。
色谱柱问题是峰分叉的关键。柱入口筛板堵塞会导致样品在柱入口扩散不均，表现为峰前端分叉；色谱柱键合相流失或柱效下降，会导致组分分离能力下降。排查时先更换柱入口筛板，若分叉消失则为筛板问题；若未改善，需检测柱效（如用萘标样测定C18柱理论塔板数），若柱效下降超过30%，需更换色谱柱。日常需避免将色谱柱暴露在pH（<2或>8）条件下，防止键合相流失。
系统污染或死体积过大也会导致峰分叉。进样针污染、进样阀残留会引入杂质峰，表现为分叉；色谱柱与检测器连接管路过长、接头松动会产生死体积，导致峰展宽分叉。解决方法为：用甲醇超声清洗进样针（50℃，20分钟），进样阀用10%硝酸溶液冲洗（针对金属残留）；更换短路径连接管（如10cm长、0.17mm内径的PEEK管），拧紧接头确保无渗漏，减少死体积。
四、预防措施：延长仪器寿命的核心要点
故障预防优于事后维修。日常使用中需做好三方面工作：一是样品管理，所有样品必须经0.22μm滤膜过滤，复杂样品需预处理后再进样；二是色谱柱维护，实验结束后及时冲洗，长期不用时用甲醇-乙腈（1:1）封存，避免柱内干涸；三是定期校准，每季度对泵的流量准确性、检测器波长进行校准，每年更换单向阀、密封圈等易损件。
综上，安捷伦液相色谱仪的三类常见故障均有明确的成因与解决路径。排查时需遵循“由简至繁、由前至后"的原则，结合压力曲线、峰形变化等细节精准定位问题。通过科学的故障处理与日常维护，可有效提升仪器运行稳定性，保障检测数据的准确性。
