LC-MS在生物制药分析新趋势 - HCPs残留的分析

HCPs监测是生物药生产过程中的关键质量属性（CQA），需要在开发和生产过程中对其存在进行监测、控制和记录。而选择合适的方法与可靠的试剂也十分关键。LC-MS方法分析HCPs的使用可以弥补HCP-ELISA方法的不足，如识别和量化单个HCP的能力，无需依赖抗HCP抗体。因此，该方法的应用及相应的监管要求在未来可能会增加。

LC-MS方法对生物药物开发有诸多好处

1. 可确定原液中HCP，并比较GMP生产条件下的批间差异；

2. 可鉴定对患者安全和产品稳定性有潜在影响的特定种类HCPs；

3. 可用于评价纯化过程中去除特定HCP的效果，例如高丰度的HCPs和潜在风险因子HCPs。

每个纯化步骤后的HCP谱可以起到控制杂质清除的目的，并证明生产的一致性和稳健性。此外，LC-MS可以用于复杂生物药物的蛋白杂质分析，如病*疫苗和基因治疗产品。这类产品的工艺相关杂质来自多种生物体以及其他多种来源，包括人源细胞系、重组血清白蛋白、核*酶，以及制造过程中使用的其他酶等。

2017 年以来，有多家生物制药公司已通过LC-MS方法分析各种蛋白质生物药物中的HCP，包括单克隆抗体、疫苗和其他生物制剂。不同的品牌仪器，不同的数据库软件，不同的量化方法都能得到可靠的分析结果。

当选择LC-MS作为生物制药HCP分析方法时，无论是定量方法还是定性方法，都有必要进行适用性验证。LC-MS方法分析HCP比较复杂，重现性非常重要。该方法由多个步骤组成，包括：蛋白变性、还原、烷基化、胰酶消化为肽段，肽段通过HPLC柱分离，并通过MS进行分析。样品可能被消化为数千个肽段，产生数千张MS图谱。因此，整合及在过程中建立内部控制品（QC）就至关重要，重复性和灵敏度也是质谱系统至关重要的参数。