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11种关于二手液相谱图问题解决方法

发布时间:2022-07-01      点击次数:541

二手液相色谱仪的很多问题都能在色谱图中体现出来。近期,很多用户咨询关于液相色谱图的各种问题,皆及时得到解决,今天我们汇总一下二手液相谱图问题解决方法,希望能够让大家使用液相色谱时能够防患于未然!


以下为您总结11种关于二手液相谱图问题解决方法:


(一)二手液相谱图峰拖尾的原因和解决方法


1、筛板阻塞:反冲色谱柱,更换进口筛板,更换色谱柱;


2、色谱柱塌陷:填充色谱柱;


3、干扰峰:使用更长的色谱柱,改变流动相或更换色谱柱;


4、流动相PH选择错误:调整PH值。对于碱性化合物,低PH值更有利于得到对称峰;


5、样品与填料表面的溶化点发生反应图:加入离子对试剂或碱性挥发性修饰剂,更改色谱柱。


(二)二手液相谱图峰前延的原因和解决方法


1、柱温低:升高柱温;


2、样品溶剂选择不恰当:使用流动相作为样品溶剂;


3、样品过载:降低样品含量;


4、色谱柱损坏:反冲色谱柱,填充色谱柱。


(三)二手液相谱图峰分叉的原因和解决方法


1、保护柱或分析柱污染图:取下保护柱再进行分析。如果必要更换保护柱。如果分析柱阻塞,拆下来清洗。如果问题仍然存在,可能是柱子被强保留物质污染,运用适当的再生措施。如果问题仍然存在,入口可能被阻塞,更换筛板或更换色谱柱。


2、样品溶剂不溶于流动相:改变样品溶剂。如果可能采取流动相作为样品溶剂。


(四)二手液相谱图峰变形的原因和解决方法


样品过载:减少样品载量


(五)二手液相谱图早出的峰变形的原因和解决方法


样品溶剂选择不恰当:减少进样体积,运用低极性样品溶剂。


(六)二手液相谱图早出的峰拖尾程度大于晚出的峰的原因和解决方法


柱外效应:调整系统连接(使用更短、内径更小的管路),使用小体积的流通池。


(七)二手液相谱图K‘增加时,脱尾更严重的原因和解决方法


1、二级保留效应,反相模式:加入三乙胺(或碱性样品),加入乙酸(或酸性样品),加入盐或缓冲剂(或离子化样品),更换一支柱子;


2、二级保留效应,正相模式:加入三乙胺(或碱性样品),加入乙酸(或酸性样品),加入水(或多官能团化合物),试用另一种方法;


3、二级保留效应,离子对:加入三乙胺(或碱性样品)。


(八)二手液相谱图酸性或碱性化合物的峰拖尾的原因和解决方法


缓冲不合适:使用浓度50-100mM的缓冲液,使用Pka等于流动相PH值的缓冲液。


(九)二手液相谱图额外的峰的原因和解决方法


1、样品中有其他组份:正常;


2、前一次进样的洗脱峰:增加运行时间或梯度斜率,提高流速;


3、空位或鬼峰:检查流动相是否纯净,使用流动相作为样品溶剂,减少进样体积。


(十)二手液相谱图保留时间波动的原因和解决方法


1、温控不当:调好柱温;


2、流动相组分变化:防止变化(蒸发、反应等);


3、色谱柱没有平衡:在每一次运行之前给予足够的时间平衡色谱柱。


(十一)二手液相谱图保留时间不断变化的原因和解决方法


1、流速变化:重新设定流速;


2、泵中有气泡:从泵中除去气泡;


3、流动相选择不恰当:更换合适的流动相;选择合适的混合流动相。


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