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看图例了解二手液质联用仪检测流程

发布时间:2022-06-15      点击次数:226

如今蛋白组/代谢组学被广泛应用于生命科学领域,液相色谱串联质谱技术(液质联用)是蛋白组/代谢组学研究的主要手段,因此液质联用受到了医学科学们非常大的重视。


液质联用仪是将液相色谱仪与质谱仪联用的仪器,用于样品定性定量分析。其特点是将应用范围非常广的液相色谱分离方法与灵敏、专属、能提供分子量和结构信息的质谱法结合起来的一种现代分析技术。


二手液质联用仪技术原理:


样品通过液相色谱分离后的各个组分依次进入质谱检测器,各组分在离子源被离子化,产生带有一定电荷、质量数不同的离子。不同离子在电磁场中的运动行为不同,采用质量分析器按不同质荷比(m/z)把离子分开,得到依质荷比顺序排列的质谱图。通过对质谱图的分析处理,可以得到样品的定性和定量结果。


液相色谱分析的一般流程图解

液相色谱分析的一般流程图解


液相色谱部分由进样系统、输液系统、分离系统三个部分组成


(1)进样装置要求密封性好,死体积小,重复性好,中心进样,进样时对色谱系统的压力、流量影响小。


(2)输液系统主要的是梯度洗脱装置——有两种方式:一种称低压梯度,指常压下溶剂按一定比例混合后再由高压泵输入色谱柱,又称外梯度;另一种称高压梯度,指先用高压泵将各溶剂输入混合器混合,再送入色谱柱,也称为内梯度。


(3)分离系统包括色谱柱、连接管和恒温器等。与单纯LC相比,LC-MS一般流速较低(高流速可能影响雾化效果),所以一般用窄径柱,即2 mm或2.1mm的,粒径一般为3.5μm,也有1.7μm的。


质谱的电离与质量分析流程图解

质谱的电离与质量分析流程图解


(1)ESI电离:其工作原理是将液滴变成蒸汽,产生离子发射的过程中形成的溶剂由液相泵输送到ESI Probe,经其内的不锈钢毛细管流出,这时给毛细管加2-4 kv的高压,由于高压和雾化气的作用,流动相从毛细管顶端流出时,会形成扇状喷雾,使液滴生成含样品和溶剂离子的气溶胶。ESI属于zui软的电离方式,通常只产生分子离子峰。适合热不稳定的极性分子,能分析小分子及大分子。


(2)四极杆质量分析器:四极杆内所包围的空间存在双曲线形电场。从离子源入射的加速离子穿过四极杆中的电场会受到电场作用,只有选定的m/z离子以限定的频率稳定的通过四极杆质量分析器,其他离子则碰到极杆上被吸滤掉,不能通过,即达到“滤质"的作用。四极杆质量分析器结构紧凑,体积小,扫描速度快,适用于LC-MS联用仪。


二手液质联用仪检测流程总结


所谓液相色谱串联质谱实验,就是通过液相色谱把要分析的混合物分离开,再用质谱对某个或某些分子进行定性或定量。它的强大功能使之不仅能轻松面对单个分子的研究,更加适合针对于复杂样本的“组学"分析。由于蛋白质和小分子性质的差异,面向蛋白组学和代谢组学的液质联用系统也有所区别,我们将在后续的篇幅中介绍液质联用系统在各类学研究中的应用,敬请期待。

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